New sources of botanical acaricides from species of Croton with potential use in the integrated management of Tetranychus urticae / Nuevas fuentes de acaricidas botánicos de especies de Croton con uso potencial en el manejo integrado de Tetranychus urticae

Essential oils from the leaves and stems of Croton adenocalyx, C. grewioides, C. heliotropiifoliusand C. blanchetianus obtained through hydrodistillation were analyzed by GC-MS. We then investigated the lethal and sublethal effects of the Croton oils and 15 major constituents against Tetranychus urticae. ß-Caryophyllene was the major component in the leaf and stem oils from C. heliotropiifolius and C. adenocalyx. Spathulenol and (E)-anethole were the major constituents identified in the leaf and stem oils of C. blanchetianus and C. grewioides, respectively. The oil with the greatest lethal and sublethal effects was those from C. adenocalyx. Among the constituents ß-caryophyllene and spatulenol were the most toxic to the mite, where as eugenol and methyl eugenol were the most repellent. The toxicity and repellency of the Croton oils, particularly the oils from C. adenocalyx, demonstrate that these oils constitute a promising alternative to synthetic acaricides for use in the control of T. urticae.

Los aceites esenciales de las hojas y tallos de Croton adenocalyx, C. growioides, C. heliotropiifolius y C. blanchetianus obtenidos mediante hidrodestilación fueron analizados a través de GC-MS. Se investigaron los efectos letales y subletales de los aceites de Croton y 15 componentes principales contra Tetranychus urticae. El ß-cariofileno fue el componente principal en los aceites de hojas y tallos de C. heliotropiifolius y C. adenocalyx. El espatulenol y el (E)-anetol fueron los principales componentes identificados en los aceites de hojas y tallos de C. blanchetianus y C. growioides, respectivamente. El aceite con los mayores efectos letales y subletales fue el de C. adenocalyx. Entre los componentes, el ß-cariofileno y el espatulenol fueron los más tóxicos para el ácaro, mientras que el eugenol y el metil eugenol fueron los más repelentes. La toxicidad y la repelencia de los aceites de Croton, particularmente los aceites de C. adenocalyx, demuestran que estos aceites constituyen una alternativa prometedora respecto a los acaricidas sintéticos para uso en el control de T. urticae.

Effects of essential oils on native and recombinant acetylcholinesterases of Rhipicephalus microplus / Efeito de óleos essenciais sobre acetilcolinesterases nativa e recombinante de Rhipicephalus microplus

Abstract This study reports the action of essential oils (EO) from five plants on the activity of native and recombinant acetylcholinesterases (AChE) from Rhipicephalus microplus. Enzyme activity of native susceptible AChE extract (S.AChE), native resistant AChE extract (R.AChE), and recombinant enzyme (rBmAChE1) was determined. An acetylcholinesterase inhibition test was used to verify the effect of the EO on enzyme activity. EO from Eucalyptus globulus, Citrus aurantifolia, Citrus aurantium var.dulcis inhibited the activity of S.AChE and R.AChE. Oils from the two Citrus species inhibited S.AChE and R.AChE in a similar way while showing greater inhibition on R.AChE. The oil from E. globulus inhibited native AChE, but no difference was observed between the S.AChE and R.AChE; however, 71% inhibition for the rBmAChE1 was recorded. Mentha piperita oil also inhibited S.AChE and R.AChE, but there was significant inhibition at the highest concentration tested. Cymbopogon winterianus oil did not inhibit AChE. Further studies are warranted with the oils from the two Citrus species that inhibited R.AChE because of the problem with R. microplus resistant to organophosphates, which target AChE. C. winterianus oil can be used against R. microplus populations that are resistant to organophosphates because its acaricidal properties act by mechanism(s) other than AChE inhibition.

Resumo Este estudo relata a ação de óleos essenciais de cinco plantas na atividade de acetilcolinesterases (AChE) nativas e recombinantes de Rhipicephalus microplus. A atividade enzimática do extrato de acetilcolinesterase nativa suscetível (S.AChE) e resistente (R.AChE) e da enzima recombinante (rBmAChE1) foi determinada. Um teste de inibição da AChE foi utilizado, para verificar o efeito dos óleos essenciais sobre a atividade enzimática. Óleos essenciais de Eucalyptus globulus, Citrus aurantifolia, Citrus aurantium var. dulcis inibiram a atividade de S.AChE e R.AChE. Os óleos das duas espécies de Citrus inibiram S.AChE e R.AChE de maneira semelhante, mas mostraram maior inibição sobre R.AChE. O óleo de E. globulus inibiu a AChE nativa, mas sem diferença entre a S.AChE e a R.AChE; no entanto, 71% de inibição para rBmAChE1 foi observada. O óleo de Mentha piperita também inibiu S.AChE e R.AChE, mas houve inibição significativa apenas nas concentrações mais altas testadas. O óleo de Cymbopogon winterianus não inibiu a AChE. Estudos adicionais são necessários com os óleos das duas espécies de Citrus que inibiram a R.AchE, devido ao problema de R. microplus resistente aos organofosforados ter como alvo AChE. O óleo de C. winterianus pode ser usado contra populações de R. microplus, que são resistentes a organofosforados, porque suas propriedades acaricidas agem por mecanismos diferentes.

Acaricidal activity of essential oils of Cinnamomum zeylanicum and Eremanthus erythropappus, major compounds and cinnamyl acetate in Rhipicephalus microplus / Atividade acaricida dos óleos essenciais de Cinnamomum zeylanicum e Eremanthus erythropappus, compostos majoritários e acetato de cinamila sobre Rhipicephalus microplus

Abstract This study aimed to chemically characterize the essential oils (EOs) of Cinnamomum zeylanicum (cinnamon) and Eremanthus erythropappus (candeia) and evaluate their acaricidal activity, together with that of their major compounds and cinnamyl acetate derivative, against Rhipicephalus microplus. Essential oil compounds were identified through gas chromatography. The larval packet test (LPT) at concentrations ranging from 0.31 to 10.0 mg/mL and the adult immersion test (AIT) at concentrations between 2.5 and 60.0 mg/mL were performed. (E)-cinnamaldehyde and α-bisabolol were the major compounds in cinnamon (86.93%) and candeia (78.41%) EOs, respectively. In the LPT, the EOs of cinnamon and candeia and the compounds (E)-cinnamaldehyde, α-bisabolol and cinnamyl acetate resulted in 100% mortality at concentrations of 2.5, 2.5, 5.0, 10.0 and 10.0 mg/mL respectively. In the AIT, percentage control values > 95% were observed for cinnamon and candeia EOs, (E)-cinnamaldehyde and α-bisabolol at the concentrations of 5.0, 60.0, 20.0, and 20.0 mg/mL, respectively, whereas cinnamyl acetate showed low activity. We conclude that EOs and their compounds showed high acaricidal activity, whereas the acetylated derivative of (E)-cinnamaldehyde presented less acaricidal activity on R. microplus engorged females.

Resumo Este estudo teve como objetivo caracterizar quimicamente os óleos essenciais (OE) de Cinnamomum zeylanicum (canela) e Eremanthus erythropappus (candeia) e avaliar sua atividade acaricida, juntamente com a de seus principais compostos e do derivado de acetato de cinamila, sobre Rhipicephalus microplus. Os compostos do óleo essencial foram identificados por cromatografia gasosa. Foram realizados o Teste de Pacote de Larvas (TPL), em concentrações variando de 0,31 a 10,0 mg/mL, e o Teste de Imersão de Adultos (TIA), em concentrações entre 2,5 e 60,0 mg/mL. (E)-cinnamaldeído e α-bisabolol foram os principais compostos nos OE da canela (86,93%) e da candeia (78,41%), respectivamente. No TPL, os OEs de canela e candeia, e os compostos (E)-cinnamaldeído, α-bisabolol e acetato de cinamila resultaram em 100% de mortalidade nas concentrações de 2,5, 2,5, 5,0, 10,0 e 10,0 mg/mL, respectivamente. No TIA, valores percentuais de controle >95% foram observados para OE de canela e candeia, (E)-cinnamaldeído e α-bisabolol nas concentrações de 5,0, 60,0, 20,0 e 20,0 mg/mL, respectivamente, enquanto o acetato de cinamila apresentou baixa atividade. Conclui-se que os OEs e seus compostos apresentaram alta atividade acaricida, enquanto o derivado acetilado do (E)-cinnamaldeído apresentou menor atividade acaricida em fêmeas ingurgitadas de R. microplus.

Status of Rhipicephalus microplus resistance to ivermectin, fipronil and fluazuron in Mato Grosso do Sul, Brazil / Status da resistência de Rhipicephalus microplus a ivermectina, fipronil e fluazuron em Mato Grosso do Sul

Abstract Southern cattle tick resistance to pour-on and injectable acaricides has yet to be evaluated on a broader scope, and the paucity of information on the subject may hinder efforts to control this parasite. The objective of this study was to evaluate the resistance profile of ten populations of Rhipicephalus microplus to the acaricides fluazuron, fipronil and ivermectin in cattle herds in Mato Grosso do Sul, Brazil. The larval immersion test (LIT) was used to evaluate susceptibility to ivermectin and fipronil and the adult immersion test (AIT) was performed to evaluate fluazuron. Samples were randomly obtained in ten farms, and in general, we found resistance in five samples to fluazuron and in four samples to ivermectin and fipronil. Six samples showed incipient resistance to ivermectin and fipronil. Five of the ten evaluated samples showed resistance and/or incipient resistance to all the active ingredients, and the other five to two active ingredients. Among the samples classified as resistant, the average resistance ratio for ivermectin was 2.75 and 3.26 for fipronil. These results demonstrate the advanced status of resistance to the most modern chemical groups for the control of R. microplus in the state of Mato Grosso do Sul.

Resumo A resistência do carrapato-do-boi a acaricidas com modo de aplicação "pour-on" e injetáveis é pouco avaliada em estudos mais abrangentes, e essa escassez de informação pode resultar falhas no seu controle. Este estudo teve como objetivo avaliar o perfil de resistência em dez populações de Rhipicephalus microplus aos acaricidas fluazuron, fipronil e ivermectina, em rebanhos bovinos em Mato Grosso do Sul, Brasil. A caracterização fenotípica da resistência foi realizada por meio do teste de imersão de adultos (AIT) para o fluazuron, e teste de imersão de larvas (LIT) para fipronil e ivermectina. As amostras foram obtidas aleatoriamente em dez fazendas, sendo diagnosticada resistência em cinco amostras ao fluazuron e em quatro amostras à ivermectina e fipronil. Seis amostras apresentaram resistência incipiente à ivermectina e fipronil. Cinco das dez amostras avaliadas apresentaram resistência e / ou resistência incipiente a todos os princípios ativos, e as outras cinco a dois princípios ativos. Entre as amostras classificadas como resistentes, a média do fator de resistência para ivermectina foi de 2,75 e de 3,26 para fipronil. Esses resultados demonstram o avançado estado de resistência aos mais modernos grupos químicos para o controle de R. microplus em Mato Grosso do Sul.

Biological activities and phytochemical screening of leaf extracts from Zanthoxylum caribaeum L. (Rutaceae) / Atividades biológicas e prospecção fitoquímica de extratos vegetais das folhas de Zanthoxylum caribaeum L. (Rutaceae)

The Brazilian flora is known for its vast biodiversity; however, many species have been still little studied regarding to their chemical composition and biological potential. Thus, this study aimed to determine the antimicrobial, antioxidant and acaricidal activity of the extracts of leaves of Zanthoxylum caribaeum L. In addition, phytochemical screening of these extracts was carried out to determine the main classes of secondary metabolites present in Z. caribaeum. Using the Z. caribaeum leaves, aqueous and organic extracts were obtained using the following solvents (ethanol, methanol, hexane, acetone, dichloromethane and ethyl acetate). The antimicrobial activity of extracts was determined by broth microdilution method, and to detect antioxidant activity the method of capturing the free radical 2,2-diphenyl-1-picryl hydrazyl (DPPH) was used. The acaricidal activity of the extracts was tested on Dermanyssus gallinae (De Geer) (Acari: Dermanissidae). Ethanolic and methanolic extracts presented antimicrobial activity for most of the bacterial strains tested, as well as for yeast Candida albicans. The ethanolic extract presented high free radical sequestration potential (71.2%) and antioxidant capacity (the lowest IC50 value - 24.39 µg mL-1). The crude extracts obtained with methanol and acetone were the most promising. In general, phytochemical screening indicated the presence of steroids, flavanones, flavones, flavonols, saponins, tannins, triterpenoids and xanthones.

A flora brasileira é conhecida pela sua vasta biodiversidade, no entanto, muitas espécies ainda são pouco estudadas quanto à composição química e ao potencial biológico. Assim, esse trabalho teve como objetivo determinar a atividade antimicrobiana, antioxidante e acaricida dos extratos vegetais das folhas de Zanthoxylum caribaeum L. Adicionalmente, foi realizada triagem fotoquímica desses extratos para determinar as principais classes de metabólitos secundários presentes em Z. caribaeum. Empregando-se as folhas de Z. caribaeum foram obtidos o extrato aquoso e orgânicos, utilizando os seguintes solventes (etanol, metanol, hexano, acetona, diclorometano e acetato de etila). A atividade antimicrobiana dos extratos foi determinada pelo método de microdiluição em caldo, e para detecção da atividade antioxidante foi empregado o método de captura do radical livre 2,2-difenil-1-picril hidrazil (DPPH). A atividade acaricida dos extratos foi avaliada frente a Dermanyssus gallinae (De Geer) (Acari: Dermanissidae). Os extratos brutos etanólico e metanólico apresentaram atividade antimicrobiana para a maioria das cepas bacterianas testadas, e também para a levedura Candida albicans. O extrato etanólico apresentou elevado potencial de sequestro de radicais livres (71,2%) e o menor valor de IC50 (24,39µg mL-1), revelando, portanto, sua capacidade antioxidante. No que se refere à atividade acaricida, os extratos obtidos com metanol e acetona foram os mais promissores. De modo geral, a triagem fitoquímica indicou a presença de esteroides, flavanonas, flavonas, flavonóis, saponinas, taninos, triterpenóides e xantonas.

Chemical composition and acaricidal activity of essential oils and selected terpenes from two species of Psidium in the Cerrado biome of Brazil against Tetranychus urticae / Composición química y actividad acaricida del aceite esencial y terpenos seleccionados de dos especies de Psidium de Cerrado Biome de Brasil contra Tetranychus urticae

The aim of this study was to investigate the chemical composition and acaricidal effect of two Psidium species essential oils and selected compounds on Tetranychus urticae. Essential oils from the leaves of Psidium laruotteanum and Psidium myrsinites were obtained through hydrodistillation, analyzed using CG-FID and CG-MS and evaluated for toxicity to T. urticae by fumigation and residual contact. The susceptibility of T. urticae to monoterpenes and sesquiterpenes was also investigated. The major constituents of the P. laruotteanum oil were (E)-nerolidol (9.6 ± 0.4%) and γ-terpinene (9.4 ± 0.6%) and the major constituents of the P. myrsinites oil were ß-caryophyllene (21.2 ± 0.9%) and α-humulene (10.3 ± 0.5%). Based on the LC50 estimates, no significant differences were found between the two oils regarding toxicity by fumigation or residual contact. ß-Caryophyllene and (E)-nerolidol had the highest level of toxicity, independently of the method investigated. The findings indicate that both oils and selected constituents, especially ß-caryophyllene and (E)-nerolidol, are promising as natural acaricidal agents that affect T. urticae through more than one mode of action.

Los aceites esenciales de las hojas de Psidium laruotteanum y Psidium myrsinites se obtuvieron por hidrodestilación, se analizaron por CG-FID y CG-MS, y se evaluaron sus toxicidades por fumigación y contacto residual contra Tetranychus urticae. Se investigó también la susceptibilidad del T. urticae a monoterpenos y sesquiterpenos. En el aceite esencial de P. laruotteanum, (E)-nerolidol (9.6 ± 0.4%) y γ-terpinene (9.4 ± 0.6%) se identificaron como constituyentes mayoritarios, mientras que en el aceite esencial de P. myrsinites, ß-caryophyllene (21.2 ± 0.9%) y α-humulene (10.3 ± 0.5%) se encontraron como mayoritarios. Con base en las CL50 estimadas, no se observaron diferencias significativas entre las toxicidades de los aceites por fumigación, y tampoco por contacto residual. ßCaryophyllene y (E)-nerolidol presentaron las mayores toxicidades, independientemente del método investigado. Estos resultados indican, que los dos aceites, así como los constituyentes seleccionados, entre los que se destacan ß-caryophyllene y (E)-nerolidol, son promisores agentes acaricidas naturales por actuar en el T. urticae por más de un mecanismo de acción.

Anti-tick effect and cholinesterase inhibition caused by Prosopis juliflora alkaloids: in vitro and in silico studies / Efeito carrapaticida e inibição da acetilcolinesterase por alcaloides de Prosopis juliflora: estudos in vitro e in silico

Abstract We investigated the in vitro acaricide activity of the methanolic extract (ME) and alkaloid-rich fraction (AF) of Prosopis juliflora on Rhipicephalus microplus and correlated this effect with acetylcholinesterase (AChE) inhibition. The acaricide activity was evaluated using adult and larval immersion tests. Also, we studied the possible interaction mechanism of the major alkaloids present in this fraction via molecular docking at the active site of R. microplus AChE1 (RmAChE1). Higher reproductive inhibitory activity of the AF was recorded, with effective concentration (EC50) four times lower than that of the ME (31.6 versus 121 mg/mL). The AF caused mortality of tick larvae, with lethal concentration 50% (LC50) of 13.8 mg/mL. Both ME and AF were seen to have anticholinesterase activity on AChE of R. microplus larvae, while AF was more active with half-maximal inhibitory concentration (IC50) of 0.041 mg/mL. The LC-MS/MS analyses on the AF led to identification of three alkaloids: prosopine (1), juliprosinine (2) and juliprosopine (3). The molecular docking studies revealed that these alkaloids had interactions at the active site of the RmAChE1, mainly relating to hydrogen bonds and cation-pi interactions. We concluded that the alkaloids of P. juliflora showed acaricide activity on R. microplus and acted through an anticholinesterase mechanism.

Resumo A atividade carrapaticida in vitro do extrato metanólico (EM) e da fração de alcaloides (FA) de Prosopis juliflora foi investigada, frente ao Rhipicephalus microplus, e relacionada com a inibição da enzima acetilcolinesterase (AChE). A predição in silico das interações de alcaloides dessa fração com a AChE1 de R. microplus (RmAChE1) foi realizada por acoplamento molecular. A atividade carrapaticida foi avaliada, utilizando-se os ensaios de imersão de adultos e larvas. Maior efeito sobre parâmetros reprodutivos de teleóginas foi verificado para a FA, com valor de Concentração Efetiva 50% (CE50) (31.6 mg/mL), quatro vezes menor do que o valor do EM (121 mg/mL). A FA induziu mortalidade de larvas (Concentração Letal de 50% - CL50 = 13,8 mg/mL). A inibição da atividade da AChE de larvas do carrapato foi observada para EM e FA, sendo a FA mais ativa (Concentração Inibitória 50%- CI50 de 0,041mg/mL). As análises químicas da FA permitiram a identificação dos alcaloides prosopina (1), juliprosinina (2) e juliprosopina (3). No ensaio in silico, observou-se que esses alcaloides podem interagir com o sítio ativo da RmAChE1, principalmente por ligações de hidrogênio e interações cátion-pi. Os alcaloides de P. juliflora têm atividade carrapaticida contra R. microplus, atuando através do mecanismo anticolinesterásico.

Chemical composition and acaricidal activity of Ocotea notata (Lauraceae), an endemic species from Brazil, against the cattle tick Rhipicephalus microplus / Composición química y actividad acaricida de Ocotea notata (Lauraceae), una especie endémica de Brasil, contra la garrapata del ganado Rhipicephalus microplus

Rhipicephalus microplus, is one parasites that cause severe productivity losses in the cattle industry of Brazil and shows increasing resistance to conventional pesticides. This research aims to study the chemical composition, and acaricidal activity of the essential oil from Ocotea notata leaves, a brazilian endemic species, against R. microplus. The effect on R. microplus engorged adult females was evaluated using the immersion test. The oil reduced the survival by 90% after incubation for 15 days and there was 100% reduction for posture inhibition and reproductive capacity. These results suggest that the O. notata essential oil has activity on the R. microplus.

Rhipicephalus microplus, es un parásito que causa graves pérdidas de productividad en la industria ganadera de Brasil y muestra una creciente resistencia a los pesticidas convencionales. Esta investigación tiene como objetivo estudiar la composición química y la actividad acaricida del aceite esencial de las hojas de Ocotea notata, una especie endémica brasileña, contra R. microplus. El efecto sobre las hembras adultas engordadas de R. microplus se evaluó mediante la prueba de inmersión. El aceite redujo la supervivencia en 90% después de la incubación durante 15 días y hubo una reducción del 100% para la inhibición de la postura y la capacidad reproductiva. Estos resultados sugieren que el aceite esencial de O. notata tiene actividad contra R. microplus.

Sublethal effect of Abamectin in the functional response of the predator Phytoseiulus persimilis (Athias-Henriot) on Tetranychus urticae (Koch) (Acari: Phytoseiidae, Tetranychidae) / Efeito subletal da Abamectina na resposta funcional do predador Phytoseiulus persimilis (Athias-Henriot) em Tetranychus urticae (Koch) (Acari: Phytoseiidae, Tetranychidae)

Abstract The biological control used for the control of Tetranychus urticae (Koch) is the predator mite Phytoseiulus persimilis (Athias-Henriot). It is important to the know the effects of acaricides on the biological behavior the Abamectin on the functional response of P. persimilis. The functional response of the predator was of type II exposed to concentration of Abamectin, the functional response parameters: successful attack rate (a'), handling time (Th), search efficiency and the maximum predation theory (T/Th) were affected by the acaricide. The predator spends more time in persecute, dominate, consume and prepair it self to the next searching comparing with the proof subject an the predation ability was affected.

Resumo O controle biológico utilizado para o controle de Tetranychus urticae (Koch) é o acaro predador Phytoseiulus persimilis (Athias-Henriot). É importante conhecer os efeitos dos acaricidas sobre o comportamento biológico do predador. Foi avaliado o efeito tóxico de a Abamectina na resposta funcional de P. persimilis. A resposta funcional do predador foi tipo II exposta a concentrações subletais de Abacmetina, os parâmetros da resposta funcional: taxa de ataque (a'), tempo de manipulação (Th), a eficiência na procura e predação teórica máxima (T/Th) foram afetados pelo acaricida. O predador passa mais tempo na procura, dominar, consumir e se preparar para a próxima procura em comparação com a testemunha e sua capacidade de predação foi afetada.

Acaricidal and insecticidal effects of essential oils against ectoparasites of veterinary importance / Efectos acaricidas e insecticidas de los aceites esenciales contra los ectoparásitos de importancia veterinaria

Ectoparasitism in animals has become an issue of great concern that needs to be resolved to prevent huge economic losses occurring to livestock industry all over the world. Synthetic adrugs have been playing a major role in controlling ectoparasites, but their frequent and irrational use has resulted in drug resistance to routinely used chemicals and their residual effects on food and environment. Therefore, this approach of using chemical acaricides and insecticides is losing its popularity and effectiveness in controlling ectoparasites. So, the development of alternative approaches in ectoparasite management is currently required. Among alternative protocols, plants and their essential oils have played remarkable role in controlling different ectoparasites (ticks, flies, mites, lice) of veterinary importance. Essential oils have been proved to be cheaper, more effective and safer therapeautic agents against different ectoparasites of livestock importance.

En los animales el ectoparasitismo se ha convertido en un tema de gran preocupación que debe resolverse para evitar que se produzcan grandes pérdidas económicas para la industria ganadera en todo el mundo. Los aditivos sintéticos han desempeñado un papel importante en el control de los ectoparásitos, pero su uso frecuente e irracional ha dado como resultado la resistencia a los fármacos utilizados habitualmente y efectos residuales sobre los alimentos y el medio ambiente. Por lo tanto, el enfoque basado en el uso de acaricidas e insecticidas químicos está perdiendo popularidad y efectividad en el control de los ectoparásitos. Por lo tanto, actualmente se requiere el desarrollo de enfoques alternativos en el manejo de ectoparásitos. Entre los protocolos alternativos, las plantas y sus aceites esenciales han jugado un papel notable en el control de diferentes ectoparásitos (garrapatas, moscas, ácaros, piojos) de importancia veterinaria. Se ha demostrado que los aceites esenciales son agentes terapéuticos más baratos, más efectivos y más seguros contra diferentes ectoparásitos de importancia ganadera.

The first assessment of the stress inducible defense of Leucaena leucocephala with acaricidal potential effect against Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) / Primeira avaliação de extratos proteicos de Leucaena leucocephala induzidos por injúria mecânica com atividade carrapaticida sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae)

Abstract Plants respond to wounding caused by mechanical stress or herbivory by synthesizing defense proteins. There are no studies reporting the action of induced plant proteins against ticks. The aim of this study was to investigate the effect of mechanically wounded Leucaena leucocephala leaves against Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Initially, we carried out time course experiments to evaluate the impact of mechanical wounding on the protein content and the peroxidase, catalase and protease inhibitor activities in L. leucocephala. We then evaluated the acaricidal activity on R. (B.) microplus from protein extract collected from L. leucocephala after mechanical wounding. L. leucocephala leaves were artificially wounded, and after 6, 12, 24 and 48h, the leaves were collected for protein extraction. Quantitative and qualitative analyses of the proteins were performed. The protein content and peroxidase and protease activities increased 12h after wounding, and the acaricidal activity of this protein extract was evaluated using engorged R. (B.) microplus females. The protein extract obtained after wounding reduced egg production (8.5%) compared to those without wounding. Furthermore, the extract reduced egg hatching by 47.7% and showed an overall efficacy of 56.3% at 0.1 mgP/mL of the protein. We demonstrated that L. leucocephala defensive proteins could be effective against R. (B.) microplus.

Resumo As plantas respondem a injúria causada por estresse mecânico ou por ataque de herbívoros através da síntese de proteínas de defesa. Não há estudos de proteínas induzidas de plantas contra carrapatos. O objetivo deste estudo foi verificar a atividade acaricida de extratos protéicos de folhas Leucaena leucocephala após injúria mecânica, sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Inicialmente foram conduzidos experimentos em diferentes intervalos de tempo para avaliar o impacto da injúria mecânica no conteúdo de proteína, atividade de peroxidase, catalase e inibidor de protease de L. leucocephala. Em seguida foi avaliada a atividade acaricida sobre R. (B.) microplus de um extrato protéico após injúria mecânica. Folhas de L. leucocephala foram artificialmente feridas e após 6, 12, 24 e 48h, as folhas foram coletadas para extração de proteínas. Análises quantitativas e qualitativas das proteínas foram realizadas. A quantidade de proteína e atividades de peroxidase e protease aumentaram 12h após a injúria. O extrato proteico obtido após injúria (12h) reduziu a produção de ovos (8,5%) em comparação com extratos de plantas sem injúria. O extrato reduziu 47,7% a eclosão de ovos e apresentou eficácia geral de 56,3% a 0,1 miligrama de proteína por mL (mgP/mL). Apresentamos que proteínas de defesa de L. leucocephala podem ter atividade sobre R. (B.) microplus.

Assessment of different Lippia sidoides genotypes regarding their acaricidal activity against Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Avaliação da atividade carrapaticida do óleo essencial de diferentes genótipos de Lippia sidoides sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Abstract The aim of this study was to select different genotypes of Lippia sidoides with the highest activity against larvae and engorged females of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The germplasms studied were LSID006, LSID102, LSID103 and LSID104. The LSID104 genotype, that presented carvacrol as a major constituent, was the germplasm with the worst larvicide effect (LC50 2.99 mg/mL). The LSID006 genotype was the least effective against engorged females (LC50 12.46 mg/mL), and it was chemically similar to the LSID102 genotype, which presented the highest acaricide activity (LC50 2.81 mg/mL). We conclude that chemical similarity of the germplasms was not correlated with acaricide activity against R. (B.) microplus. The essential oil of L. sidoides is a potent natural agent. However, the findings of this work provide a better understanding for product development based on this natural product, which must consider synergic effects or the action of minor compounds.

Resumo O objetivo deste trabalho foi selecionar genótipos de Lippia sidoides que apresentem maiores atividades em larvas e fêmeas ingurgitadas do carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Os genótipos estudados foram LSID006, LSID102, LSID103 e LSID104. O genótipo LSID104, o único a conter o monoterpeno carvacrol como um dos principais constituintes, foi o que apresentou o menor efeito larvicida (CL50 2,99 mg/mL). O genótipo LSID006 apresentou menor efeito sobre fêmeas ingurgitadas (CL50 12,46 mg/mL), entretanto foi quimicamente similar ao genótipo LSID102, que apresentou a maior atividade carrapaticida (CL50 2,81 mg/mL). Conclui-se que a semelhança química dos genótipos não se correlaciona com a atividade carrapaticida contra R. (B.) microplus. O óleo essencial de L. sidoides é um agente natural potente e os resultados deste trabalho proporcionam um melhor entendimento para o desenvolvimento de produtos com base neste produto natural, devendo ser considerado os efeitos sinérgicos ou a ação de compostos presentes em menores concentrações.

Evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) resistance to different acaricide formulations using samples from Brazilian properties / Avaliação da resistência de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) a diferentes formulações acaricidas utilizando amostras de propriedades brasileiras

Abstract The Rhipicephalus (Boophilus) microplus tick is responsible for considerable economic losses in Brazil, causing leather damage, weight loss and reduced milk production in cattle and results in the transmission of pathogens. Currently, the main method for controlling this tick is using acaricides, but their indiscriminate use is one of the major causes of resistance dissemination. In this study, the adult immersion test (AIT) was used to evaluate resistance in ticks from 28 properties located in five different states (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Ceará, São Paulo, e Minas Gerais) and the Distrito Federal (DF) of Brazil. The resistance was found in 47.64% of the repetitions demonstrating an efficacy of less than 90% in various locations throughout the country. The larvae packet test was used to evaluate samples from ten properties in four states (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Minas Gerais and Espírito Santo). Spray products belonging to the main classes of acaricides, including combination formulations, were used in both types of test. New cases of resistance were found on properties within the states of Ceará, Espírito Santo and Mato Grosso, where such resistance was not previously reported.

Resumo O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por consideráveis perdas econômicas no Brasil, causando, nos bovinos, danos ao couro, perda de peso, redução na produção de leite, o que resulta na transmissão também de patógenos. Atualmente, o principal método de controle para esse carrapato é o uso de acaricidas, porém seu uso indiscriminado é uma das principais causas da disseminação da resistência. Neste estudo, o teste de imersão de adultos (TIA) foi utilizado para avaliar a resistência em carrapatos provenientes de 28 propriedades, localizadas em cinco diferentes estados brasileiros (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Ceará, São Paulo, e Minas Gerais) e no Distrito Federal (DF). A resistência foi encontrada em 47,64% das repetições, demonstrando uma eficácia de menos de 90% em vários lugares do país. O teste de pacote de larva foi utilizado para avaliar amostras de 10 propriedades em quatro estados (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Minas Gerais e Espírito Santo). Produtos de pulverização, pertencentes às principais classes de acaricidas, incluindo-se associações, foram utilizados em ambos os testes. Novos casos de resistência foram encontrados em propriedades nos estados do Ceará, Espírito Santo e Mato Grosso, nas quais a resistência ainda não havia sido previamente reportada.

In vitro effects of Pilocarpus microphyllus extracts and pilocarpine hydrochloride on Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Efeitos in vitro do extrato de Pilocarpus microphyllus e do cloridrato de pilocarpina sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Abstract The aim of this study was to assess the activity of aqueous (AE) and ethanolic extracts (EE) and pilocarpine hydrochloride, which were extracted and isolated from Pilocarpus microphyllus (Jaborandi), respectively, on Rhipicephalus (Boophilus) microplus. High performance liquid chromatography (HPLC) was performed to quantify these compounds. Larval packet and adult immersion tests were conducted with different concentrations. Five AE and EE concentrations, ranging from 6.2 to 100.0 mg mL–1, and six concentrations of pilocarpine hydrochloride, ranging from 0.7 to 24.0 mg mL–1, were tested. The lethal concentration (LC50) of each extract for larvae and engorged females was calculated through Probit analysis. The concentration of pilocarpine hydrochloride obtained from the EE and the AE was 1.3 and 0.3% (m/m), respectively. Pilocarpine hydrochloride presented the highest acaricidal activity on larvae (LC50 2.6 mg mL–1) and engorged females (LC50 11.8 mg mL–1) of R.(B.) microplus, followed by the EE which presented LC50 of 56.4 and 15.9 mg mL–1, for larvae and engorged females, respectively. Such results indicate that pilocarpine hydrochloride has acaricidal activity, and may be the primary compound responsible for this activity by P. microphyllus EE.

Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a atividade dos extratos aquoso (AE) e etanólico (EE) e do cloridrato de pilocarpina, que foram, respectivamente, extraídos e isolado de Pilocarpus microphyllus (Jaborandi), sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus. Cromatografia líquida de alta eficiência foi realizada para quantificação dos compostos. Testes de pacote de larvas e de imersão de adultos foram realizados com diferentes concentrações. Cinco concentrações do AE e EE variando de 6,2 a 100,0 mg mL–1 e seis concentrações do cloridrato de pilocarpina variando de 0,7 a 24,0 mg mL–1 foram testadas. A concentração letal (CL50) de cada extrato para larvas e fêmeas ingurgitadas foi estimada por meio da análise Probit. A concentração de cloridrato de pilocarpina obtida do EE e AE foi de 1,3 e 0,3% (m/m), respectivamente. O cloridrato de pilocarpina apresentou a maior atividade carrapaticida sobre larvas (CL50 2,6 mg mL–1) e fêmeas ingurgitadas (CL50 11,8 mg mL–1) de R. (B.) microplus, seguido do EE que apresentou CL50 de 56,4 e 15,9 mg mL–1, para larvas e fêmeas ingurgitadas, respectivamente. Tais resultados indicam que o cloridrato de pilocarpina apresenta atividade carrapaticida e pode ser o principal responsável pela atividade acaricida do EE de P. microphyllus.

Actividad acaricida del aceite esencial de la corteza de Croton malambo H. Karst, metil-eugenol y metil-isoeugenol contra Dermatophagoides farinae Hughes, 1961 / Acaricide activity of essential oil of Croton malambo H. Karst, methyl-eugenol and methyl-isoeugenol against Dermatophagoides farinae Hughes, 1961

Dermotophagoides farinae lives in the indoor environment of houses, where it is source of allergens; therefore its control is a priority in preventing respiratory allergies. The aim of this study was to evaluate the acaricidal activity of essential oil of Croton malambo H. Karst bark and their components methyl-eugenol and methyl-isoeugenol against Dermatophagoides farinae. The essential oil was obtained through hydro-distillation assisted by microwave radiation and analyzed by GC-MS. Acaricidal activity was assessed by dose- response bioassay, at different times, using benzyl benzoate as a positive control. The relative amount of methyl-eugenol and methyl- isoeugenol in the essential oil was 68.4 percent and 4.9 percent, respectively. The acaricidal activity was: essential oil > methyl-eugenol > benzyl benzoate > methyl-isoeugenol. The acaricidal properties of essential oil of Croton malambo bark and methyl-eugenol against Dermatophagoides farinae were established...

Dermatophagoides farinae habita en el interior de las casas, donde es fuente importante de alérgenos, por tanto su control es una prioridad en la prevención de alergias respiratoria. El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad acaricida del aceite esencial de la corteza de Croton malambo H. Karst y sus componentes metil-eugenol y metil-isoeugenol contra Dermatophagoides farinae. El aceite esencial se obtuvo por hidrodestilación asistida por radiación de microondas y se analizó por CG-EM. La actividad acaricida se evaluó mediante bioensayo de dosis-respuesta a diferentes tiempos, usando benzoato de bencilo como control. La cantidad relativa de metil-eugenol y metil-isoeugenol en el aceite fue 68.4 por ciento y 4.9 por ciento, respectivamente. La actividad acaricida fue: aceite esencial > metil-eugenol > benzoato de bencilo > metil-isoeugenol. Se establecieron las propiedades acaricidas del aceite esencial de la corteza de Croton malambo y metil-eugenol contra Dermatophagoides farinae...

Rhipicephalus (Boophilus) microplus resistant to acaricides and ivermectin in cattle farms of Mexico / Rhipicephalus (Boophilus) microplus resistentes aos acaricidas e ivermectina nas fazendas de gado do México

Ticks and the diseases they transmit cause great economic losses to livestock in tropical countries. Non-chemical control alternatives include the use of resistant cattle breeds, biological control and vaccines. However, the most widely used method is the application of different chemical classes of acaricides and macrocyclic lactones. Populations of the cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, resistant to organophosphates (OP), synthetic pyrethroids (SP), amitraz and fipronil have been reported in Mexico. Macrocyclic lactones are the most sold antiparasitic drug in the Mexican veterinary market. Ivermectin-resistant populations of R. (B.) microplus have been reported in Brazil, Uruguay and especially in Mexico (Veracruz and Yucatan). Although ivermectin resistance levels in R. (B.) microplus from Mexico were generally low in most cases, some field populations of R. (B.) microplus exhibited high levels of ivermectin resistance. The CHPAT population showed a resistance ratio of 10.23 and 79.6 at lethal concentration of 50% and 99%, respectively. Many field populations of R. (B.) microplus are resistant to multiple classes of antiparasitic drugs, including organophosphates (chlorpyrifos, coumaphos and diazinon), pyrethroids (flumethrin, deltamethrin and cypermethrin), amitraz and ivermectin. This paper reports the current status of the resistance of R. (B.) microplus to acaricides, especially ivermectin, in Mexican cattle.

Carrapatos e as doenças por eles transmitidas causam grandes perdas econômicas ao gado dos países tropicais. Alternativas não-químicas incluem o uso de raças de gado que sejam resistentes, controle biológico e vacinas. No entanto, o método mais utilizado é a aplicação de diferentes classes químicas de acaricidas e lactonas macrocíclicas. Populações de piolhos de gado, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, resistentes aos organofosfatos (OP), piretoides sintéticos (SP), amitraz e fipronil, foram descritas no México. Lactonas macrocíclicas são as drogas antiparasitárias mais vendidas no mercado veterinário mexicano. Populações de R. (B.) microplus resistentes à irvemectina foram relatadas no Brasil, Uruguai e especialmente no México (Veracruz e Yucatan). Embora os níveis de resistência à ivermectina no R. (B.) microplus do México tenha sido relativamente baixa, na maioria dos casos, algumas populações campestres de R. (B.) microplus mostraram altos níveis de resistência à ivermectina. A população CHPAT mostrou uma razão de resistência de 10,23 e 79,6 na concentração letal de 50% e 99%, respectivamente. Muitas populações campestres de R. (B.) microplus são resistentes a múltiplas classes de drogas antiparasitárias, incluindo organofosfatos (clorpirifós, coumafos e diazinon), piretoides (flumetrina, deltametrina e cipermetrina), amitraz e ivermectina. Este artigo relata o estado atual de resistência do R. (B.) microplus aos acaricidas, especialmente ivermectina, no gado mexicano.

Efficacy of extracts from plants of the Brazilian Pantanal against Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Eficácia de extratos de plantas do Pantanal brasileiro sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus

This research evaluated the in vitro acaricidal activity of extracts from 21 plant species from the Pantanal of Mato Grosso do Sul. During stage I, a larval immersion test was performed using three extract concentrations (5%, 20%, and 40%). During stage II, we used only plants that showed over 95% efficiency at the 40% concentration in stage I in an amount sufficient for the adult immersion test. Aeschynomene denticulata, Angelonia hirta, Aspilia latissima, Caperonia castaneifolia, Centratherum punctatum, Crotalaria micans, Diodia kuntzei, Echinodorus paniculatus, Hyptis mutabilis, Lantana canescens, Melanthera latifolia, Ocotea diospyrifolia, Richardia grandiflora, Sebastiana hispida, Tocoyena formosa, Zanthoxylum rigidum, and Sesbania virgata (fruit extract) showed acaricidal activity against the larval stage of Rhipicephalus (Boophilus) microplus higher than 95% at a 40% (w/v) concentration, while Hippocratea volubilis and Randia armata showed moderate efficacy and Croton glandulosus and Senna obtusifolia had no effect. The M. latifolia, A. hirta, R. grandiflora, and A. latissima raw extracts were evaluated for their activity against adults, and only A. hirta showed an efficacy close to 90%. Eighteen extracts had an efficacy of up to 95% against larvae at a 40% concentration, seven extracts were effective at 20%, and only one (Sebastiana hispida) was effective at a 5% concentration.

Este trabalho avaliou a atividade acaricida in vitro de extratos de 21 espécies de plantas do Pantanal de Mato Grosso do Sul. Na etapa I, foi realizado um teste de imersão larval utilizando três concentrações de extrato (5%, 20% e 40%). Na etapa II, utilizou-se apenas as plantas que apresentaram eficácia superior a 95%, na concentração de 40% na etapa I e que apresentasse quantidade suficiente para o teste de imersão de adulto. Aeschynomene denticulata, Angelonia hirta, Aspilia latissima, Caperonia castaneifolia, Centratherum punctatum, Crotalaria micans, Diodia kuntzei, Echinodorus paniculatus, Hyptis mutabilis, Lantana canescens, Melanthera latifolia, Ocotea diospyrifolia, Richardia grandiflora, Sebastiana hispida, Tocoyena formosa, Zanthoxylum rigidum e Sesbania virgata (extrato do fruto) apresentaram atividade acaricida sobre larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus superior a 95% na concentração de 40% (w/v), enquanto Hippocratea volubilis e Randia armata apresentaram eficácia moderada e Croton glandulosus e Senna obtusifolia não apresentaram efeito acaricida. Os extratos brutos de M. latifolia, A. hirta, R. grandiflora e A. latissima foram avaliados sobre adultos e A. hirta apresentou eficácia próxima de 90%. Dezoito extratos apresentaram eficácia de até 95%, contra larvas, na concentração de 40%, sete extratos foram eficazes a 20% e apenas um (Sebastiana hispida) foi eficaz na concentração de 5%.

Acaricides efficiency on Rhipicephalus (Boophilus) microplus from Bahia state north-central region / Eficiência de acaricidas sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus na região centro-norte, Bahia

The cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus is responsible for major losses in the Brazilian livestock, mainly due to reduction in cattle productive performance. Resistance development to major classes of acaricide widely used nowadays has been extensively reported, as well as the occurrence of residues from these compounds in animal products and the environment. This study aimed to evaluate the efficiency of acaricides on R. (B.) microplus collected from rural properties in the North-Central region of Bahia State. Ticks were collected in several cattle farms in the cited region, and an in vitro acaricide efficiency assay was performed based on the immersion of ticks in acaricide solutions made according to manufacturers' recommendations. The results obtained in the experiments indicated varying degrees of efficiency of the several bases studied, with the products benzofenilurea, macrocyclic lactone and fipronil showing the highest levels of efficiency, 100%, 100% and 97.34%, respectively. It was possible to conclude that, for the region studied, there are different degrees of commercial acaricides efficiency, and many present less than 95% effectiveness, value determined as acceptable by the Brazilian legislation.

O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por grandes perdas na pecuária brasileira, principalmente devido à redução no desempenho produtivo dos animais. A resistência do parasita a diferentes classes de acaricidas tem sido amplamente relatada, bem como os problemas de ocorrência de resíduos desses compostos em produtos de origem animal e no ambiente. Esse estudo teve como objetivo avaliar a eficiência de diversos acaricidas sobre populações de R. (B.) microplus provenientes de propriedades rurais da Região Centro-Norte do Estado da Bahia, Brasil. Teleóginas ingurgitadas foram colhidas em diferentes propriedades da região e submetidas a ensaio in vitro de eficiência de acaricidas, baseado na imersão dos carrapatos em soluções de acaricidas feitas seguindo as recomendações dos fabricantes. Os resultados obtidos indicam níveis variados de eficiência das bases estudadas, com os acaricidas benzofenilureia, lactona macrocíclica e fipronil apresentando os índices mais altos de eficiência, 100%, 100% e 97.34%, respectivamente. Pode-se concluir que, para a região estudada, os acaricidas apresentam níveis diversos de eficiência, e muitos deles possuem eficácia de menos de 95%, como recomendado pela legislação brasileira.

Acaricide resistance mechanisms in Rhipicephalus (Boophilus) microplus / Mecanismos de resistência aos acaricidas em Rhipicephalus (Boophilus) microplus

Acaricide resistance has become widespread in countries where cattle ticks, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, are a problem. Resistance arises through genetic changes in a cattle tick population that causes modifications to the target site, increased metabolism or sequestration of the acaricide, or reduced ability of the acaricide to penetrate through the outer protective layers of the tick’s body. We review the molecular and biochemical mechanisms of acaricide resistance that have been shown to be functional in R. (B.) microplus. From a mechanistic point of view, resistance to pyrethroids has been characterized to a greater degree than any other acaricide class. Although a great deal of research has gone into discovery of the mechanisms that cause organophosphate resistance, very little is defined at the molecular level and organophosphate resistance seems to be maintained through a complex and multifactorial process. The resistance mechanisms for other acaricides are less well understood. The target sites of fipronil and the macrocyclic lactones are known and resistance mechanism studies are in the early stages. The target site of amitraz has not been definitively identified and this is hampering mechanistic studies on this acaricide.

A resistência aos acaricidas tornou-se amplamente difundida nos países onde os carrapatos bovinos, Rhipicephalus .Boophilus. microplus, são um problema. A resistência surge por meio de alterações genéticas em umapopulação de carrapatos que causam modificações no local de ação, aumento do metabolismo ou sequestro do acaricida, ou ainda redução na capacidade do acaricida em penetrar através das camadas protetoras do corpo do carrapato. Neste artigo, foram revisados os mecanismos moleculares e bioquímicos da resistência aos acaricidas que ocorrem em R. (B.) microplus. A partir de um ponto de vista dos mecanismos envolvidos, a resistência aos piretróides tem sido caracterizada em maior grau do que em qualquer outra classe de acaricida. Embora uma grande quantidade de pesquisas têm sido direcionada para a descoberta de mecanismos que causam resistência aos organofosforados, muito pouco é conhecido ao nível molecular, e essa resistência parece ser mantida por intermédio de um processo multifatorial e complexo. Os mecanismos de resistência para os demais acaricidas são bem menos compreendidos. Os alvos de ação do fipronil e das lactonas macrocíclicas são conhecidos, e os estudos dos mecanismos de ação envolvidos estão ainda em estágios iniciais. O alvo de ação do amitraz ainda não foi definitivamente identificado, e isso é limitante aos estudos dos mecanismos envolvidos na resistência a esse acaricida.

Acaricide resistance of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in State of Mato Grosso do Sul, Brazil / Resistência do Rhipicephalus (Boophilus) microplus aos acaricidas no Estado de Mato Grosso do Sul, Brasil

This study was conducted to obtain an epidemiological view of acaricide resistance in populations of Rhipicephalus (Boophilus) microplus in the State of Mato Grosso do Sul. Twenty-four tick samples were collected from municipalities in the State where farmers had reported concerns about resistance to or failure of tick control. These ticks were subjected to in vitro resistance detection assays using the adult immersion test (AIT). The efficacy of alpha-cypermethrin, cypermethrin and amitraz treatments on samples collected throughout the State was generally poor. AIT showed efficacy > 90 percent from the use of DDVP + chlorfenvinphos) (20 out of 21 municipalities), dichlorvos + cypermethrin (10 out of 16 municipalities) and cypermethrin + citronella + chlorpyrifos + piperonyl butoxide (20 out of 21 municipalities). PCR assays were used to detect the presence of pyrethroid resistance-associated sodium channel gene mutation. Larvae from three different populations that had previously been diagnosed as pyrethroid-resistant, through AIT, were evaluated. The PCR assays showed that the pyrethroid resistance-associated gene mutation was absent from these three populations. This study confirms that the emergence of resistance is a constant challenge for the livestock industry, and that development of resistance continues to be a major driver for new antiparasitic drugs to be developed.

Este estudo foi realizado com o objetivo de se obter uma visão epidemiológica da resistência aos acaricidas nas populações de Rhipicephalus (Boophilus) microplus no Estado de Mato Grosso do Sul. Vinte e quatro amostras de carrapatos foram coletadas em cidades do estado onde os fazendeiros relataram preocupação com resistência ou falha no controle dos carrapatos. Estes carrapatos foram submetidos a testes de detecção de resistência in vitro usando o teste de imersão de adultos (TIA). A eficácia do tratamento com alfa-cipermetrina, cipermetrina e amitraz foi geralmente pobre nas amostras coletadas em todo o Estado. Obteve-se eficácia de >90 por cento no TIA com o DDVP + chlorfenvinphos (20 das 21 cidades), Diclorvós + Cipermetrina (10 das 16 cidades), e Cipermetrina + Citronela + Clorpirifós + Butóxido de piperonila (20 das 21 cidades). O ensaio da PCR foi utilizado para detectar a presença de mutação do gene do canal de sódio associado à resistência a piretróide. Avaliaram-se larvas de três diferentes populações onde anteriormente foi diagnosticada à resistência por TIA. Os ensaios da PCR mostraram que a mutação no gene associado à resistência ao piretróide estava ausente nessas três populações. Esse estudo confirma que o surgimento da resistência é um constante desafio para a pecuária e o desenvolvimento de resistência continua a ser um importante estímulo para o desenvolvimento de novas drogas antiparasitárias.